laebio：Sumoylation Control Kits 试剂

描述：
该检测试剂盒包含用于常规检测的试剂 苏莫化活性。氨基化标记（人类） 拓扑异构酶I蛋白）被加入以允许 反应的检测非常清晰。该测定法具有 已证明对粗提取物有效。人类E I， 活跃（Cat# P001;P006），人类E II， 活跃（Cat# P002;P011），以及人类相扑I， 活跃（Cat# P003;P012）是 强烈建议与此一同使用。 基特。

K007套件包含：

• SAE I 和 SAE II（人类 E I）（Cat# P006）

• UBC9（人类E II）（Cat# P011）

• 相扑I（主动形态）。（Cat#P012）

• 人类DNA拓扑异构酶I片段。（Cat#B007）

• 抗拓扑异构酶I抗体。（Cat#AP006） （液干的蚁体应在使用前用100 ul的H₂O重新组原。）

• 10X 苏莫化反应 缓冲。（Cat#B006）（10x缓冲液含有200 mM Hepes pH 7.5、50 mM MgCl₂和20 mM ATP。）

以上内容 试剂适合50次氨基化反应。

laebio：Sumoylation Control Kits 试剂

测定 条件：
苏甲?；舛ㄔ谧钪仗寤?0 ul的范围内进行 在含有20 mM的Hepes pH 7.5、5mM MgCl 2,2mM ATP。我们会的 建议添加新鲜的2mM ATP以确保 能量充足。

拓扑异构酶I：苏甲?；刂?规程：

1. 加入2 ul 50 kd 拓扑异构酶 I-片段（Cat# B007）作为 每种反应的底物。

2. 每个反应中，加2 先用 ul 来基底，然后 2 ul 的 Sumo-1,2 ul 的 10x 反应 缓冲液（Cat# B006），E1的2ul和2ul ATP含量为20 mM ATP。最后，加入H₂O 要提升到 总量为20 ul。

3. LAE氨基化蛋白的最佳反应浓度如下：推荐的条件 对照测定为37^摄氏度，适用于 30~60分钟。

• E 第一代：7.5微克/毫升

• E II：50微克/毫升

• 相扑1号：50 UG/ML

 对苏莫基化的50 Kd Topo-I蛋白（cat# B007）的12.5%凝胶印迹 搭配Topo-I抗体（cat# AP006）。巷道 1：被铳化的50Kd拓扑-I片段;第二道： 未完成的50Kd Topo-I片段。

至少可以被Topo-I抗体检测到四个主要的氨基化Topo-I片段 

Sumoylation Protocol:

1. 准备合适的 纯化底物蛋白。

2. 每个反应中，加2 先用E2的ul到基底，然后再用2 ul Sumo-1,2 ul，10 x 反应缓冲液， E1中2ul，20中2ul mM ATP。最后，加入H₂O 以 最终卷量为20 ul。

3. LAE的最佳反应浓度 蛋白质如下：

• E I：7.5微克/毫升

• E II：50微克/毫升

• 相扑一号： 50微克/毫升

运输/储存：
该套装随干冰一起发货 应储存在摄氏度-70^°C或 更低。

上海宝叶生物科技有限公司

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